Chemical and botanical characterization of Chilean propolis and biological activity on cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus

Propolis is a non-toxic natural substance with multiple pharmacological properties including anticancer, antioxidant, fungicidal, antibacterial, antiviral, and anti-inflammatory among others. The aim of this study was to determine the chemical and botanical characterization of Chilean propolis samples and to evaluate their biological activity against the cariogenic bacteria Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus. Twenty propolis samples were obtained from beekeeping producers from the central and southern regions of Chile. The botanical profile was determined by palynological analysis. Total phenolic contents were determined using colorimetric assays. Reverse phase HPLC and HPLC-MS were used to determine the chemical composition. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined on S. mutans and S. sobrinus. All propolis samples were dominated by structures from native plant species. The characterization by HPLC/MS, evidenced the presence of quercetin, myricetin, kaempferol, rutine, pinocembrin, coumaric acid, caffeic acid and caffeic acid phenethyl ester, that have already been described in these propolis with conventional HPLC. Although all propolis samples inhibited the mutans streptococci growth, it was observed a wide spectrum of action (MIC 0.90 to 8.22 µgmL-1). Given that results it becomes increasingly evident the need of standardization procedures, where we combine both the determination of botanical and the chemical characterization of the extracts. Research conducted to date, describes a promising effectiveness of propolis in the prevention of caries and other diseases of the oral cavity, making it necessary to develop studies to identify and understand the therapeutic targets or mechanisms of molecular action of the various compounds present on them.

Frequency of common variants in genes involved in lipid-lowering response to statins in Chilean subjects with hypercholesterolemia / Frecuencia de polimorfismos en genes relacionados a la respuesta terapéutica a estatinas en individuos chilenos con hipercolesterolemia

Interindividual differences in activity and expression of the metabolizing enzymes cytochrome P450 (CYP) 3A4 and 3A5 and the multidrug efflux pump P-glycoprotein (P-gp, encoded by ABCB1 gene) contribute considerably to lipid-lowering efficacy of statin treatment in subjects with hypercholesterolemia. Variability in the activity of CYP3A4, CYP3A5 and P-gp could be considered to result from genetic polymorphisms encoding their genes. However, the available data indicate that the frequencies of ABCB1, CYP3A4 and CYP3A5 gene polymorphisms differ significantly across populations. Thus, the aim of the present study was to determine the allelic frequency of three common variants of these genes in Chilean individuals with primary hypercholesterolemia (HC) and controls. A total of 135 unrelated patients (44 +/- 7 years old) with diagnosis of hypercholesterolemia (Total cholesterol 240 mg/dL) and 120 normolipidemic healthy controls (40 +/- 10 years old; total cholesterol 200 mg/dL) were included in this study. The 3435C>T (MDR1), -290A>G (CYP3A4) and 6986A>G (CYP3A5) gene polymorphisms were analyzed by PCR-RFLP. The genotype distribution for 3435C>T variant of ABCB1 in HC patients (CC: 49 percent, CT: 37 percent, TT: 14 percent) and controls (CC: 41 percent, CT: 48 percent, TT: 11 percent) was comparable (P=0.186). Similarly, the genotype distribution for -290A>G polymorphism of CYP3A4 in HC subjects (AA: 73 percent, AG: 27 percent, GG: 0 percent) and controls (AA: 71 percent, AG: 29 percent, GG: 0 percent) was equivalent (P = 0.863). Finally, the genotype distribution for 6986A>G variant of CYP3A5 in HC individuals (AA: 4 percent, AG: 41 percent, GG: 55 percent) and controls (AA: 4 percent, AG: 47 percent, GG: 49 percent) was similar (P=0.594). The allelic frequencies of 3435C>T (ABCB1), -290A>G (CYP3A4) and 6986A>G (CYP3A5) polymorphisms are similar between Chilean HC patients and controls, and comparable to frequencies found in Asian populations.

Polimorfismos de los genes CYP3A4, CYP3A5 y ABCB1 se han asociado a variaciones en la respuesta a fármacos hipolipemiantes, como las estatinas; principales medicamentos utilizados para disminuir los niveles plasmáticos de colesterol (CT). Sin embargo, la frecuencia de estas variantes genéticas puede variar entre las poblaciones. Así, el objetivo de este trabajo fue evaluar la frecuencia de tres polimorfismos de los genes CYP3A4, CYP3A5 y ABCB1, relacionados previamente a la respuesta a estatinas, en individuos chilenos hipercolesterolémicos (HC) y controles. Se analizaron 135 sujetos con diagnóstico de hipercolesterolemia primaria (CT 240 mg/dL) y 120 controles (CT 200 mg/dL) pertenecientes a la Región de La Araucanía (Chile). La genotipificación de las variantes genéticas se efectuó mediante la técnica de reacción en cadena de la polimerasa seguido de restricción enzimática (PCR-RFLP). La distribución de genotipos para la variante 3435C>T del gen ABCB1 en los individuos HC (CC: 49 por ciento, CT: 37 por ciento, TT: 14 por ciento) y controles (CC: 41 por ciento, CT: 48 por ciento, TT: 11 por ciento) fue semejante (P = 0,186). De forma similar, la distribución de genotipos para el polimorfismo -290A>G del gen CYP3A4 en los pacientes HC (AA: 73 por ciento, AG: 27 por ciento, GG: 0 por ciento) y controles (AA: 71 por ciento, AG: 29 por ciento, GG: 0 por ciento) fue equivalente (P = 0,863). Del mismo modo, la distribución de genotipos para la variante 6986A>G del gen CYP3A5 en el grupo HC (AA: 4 por ciento, AG: 41 por ciento, GG: 55 por ciento) y grupo control (AA: 4 por ciento, AG: 47 por ciento, GG: 49 por ciento) fue similar (P = 0,594). En resumen, nuestro estudio demuestra que las frecuencias de los polimorfismos 3435C>T (ABCB1), -290A>G (CYP3A4) y 6986A>G (CYP3A5) no difieren entre individuos HC y controles, y son comparables a las frecuencias encontradas en poblaciones asiáticas. Su efecto sobre el tratamiento con estatinas en la población chilena debe ser...

Efecto del propóleos chileno sobre el metabolismo de glucosa en ratones diabéticos / Effect of chilean propolis on glucose metabolism in diabetic mice

En el presente estudio se evaluó el efecto del propóleos sobre el metabolismo de la glucosa en ratones C57/BL-6 con diabetes mellitus tipo 2 inducida por dieta alta en grasa. Se midieron los cambios en las concentraciones séricas de lípidos, glucosa e insulina, y el efecto sobre la captación de 2-deoxi-[2,6-3H]-D-glucosa, síntesis de [14C]-glicógeno y descarboxilación de [U-14C]-D-glucosa inducida por insulina en músculo aislado. Los resultados muestran que en ratones diabéticos, el tratamiento con propóleos (150 mg/kg/día) reduce los niveles de insulina e índice HOMA (P<0.05). También disminuyó la obesidad abdominal de estos animales (P<0.05). Por otro lado, no modificó las concentraciones plasmáticas de glucosa, colesterol total y triglicéridos. Se observó también que la captación de 2-deoxi-[2,6-3H]-D-glucosa, síntesis de [14C]-glicógeno y descarboxilación de [U-14C]-D-glucosa inducida por insulina en músculo sóleo de ratones tratados con propóleos fue significativamente superior al grupo control (P<0.05). En resumen, nuestros datos confirman que el propóleos es capaz de modular el metabolismo de glucosa en ratones C57/BL-6 con diabetes mellitus tipo 2 inducida por dieta alta en grasa. Los datos obtenidos constituyen un importante antecedente que avala el posible uso del propóleos como fuente de polifenoles con actividad antidiabetogénica.

In the current study, we investigated the effect of propolis on diabetic mice undergoing propolis treatment (150 mg/kg/day) for a 6 week period. We also evaluated serum lipids, glucose, insulin levels and the effect on glucose uptake of 2-deoxy-D-[2,6-3H] glucose, [14C]-glycogen synthesis and [U-14C]-D-glucose decarboxylation induced by insulin in muscle tissue. Our results show that treatment with propolis (150 mg/kg/day) reduced insulin and HOMA index (P<0.05). Propolis also lowered abdominal obesity (P<0.05). No effects over serum glucose, total cholesterol and triglycerides levels were observed. We also observed that uptake of 2-deoxy-D-[2,6-3H] glucose, [14C]-glycogen synthesis and [U-14C]-D-glucose decarboxylation induced by insulin in soleus muscle of mice treated with propolis were significantly greater than control group (P<0.05). In summary, our data establishes that propolis modulates glucose metabolism. This result constitutes important data indicating that propolis can be used as a polyphenols source with antidiabetogenic activity.

Polimorfismo SNP-43 del gen de calpaína-10 en individuos con enfermedad coronaria y controles / SNP43 polymorphism of Calpain-10 gene in Southern Chilean subjects with coronary artery disease and controls

Resumen: La Diabetes mellitus tipo 2 (DMT2) es un reconocido factor de riesgo cardiovascular que ha mostrado asociación con aterosclerosis subclínica; lo cual podría ser explicado por la presencia de una base genética común entre ambas patologías. Varios polimorfismos del gen de calpaína-10 (CAPNIO) han sido asociados con insulino resistencia y DMT2, sin embargo, existe escasa evidencia de su relación con enfermedad coronaria. El objetivo del presente estudio fue evaluar la posible asociación de la variante SNP-43 de CAPNIO con el desarrollo de enfermedad coronaria en individuos del sur de Chile. Métodos: Fueron incluidos en este estudio, 218 pacientes adultos no relacionados con enfermedad arterial coronaria (EAC) confirmada mediante angiografía (estenosis >70 por ciento) y 194 individuos controles. La variante genética UCSNP-43 fue estudiada por PCR-RFLP. Resultados: No se observaron diferencias significativas entre las frecuencias genotípicas de la variante UCSNP-43 en pacientes con EAC (GG: 51.4 por ciento; GA: 42.7 por ciento; AA: 5.9 por ciento) y controles (GG: 59.6 por ciento; GA: 35.1 por ciento; AA: 5.2 por ciento, p=0.228). Similarmente, no hubo diferencias significativas entre las frecuencias alélicas entre pacientes con EAC y controles (p=0.200). La Odds Ratio fue de 1.17 (I.C 95 por ciento: 0.50-2.72), confirmando la ausencia reasociación. Conclusión: Nuestros datos sugieren que la variante UCSNP-43 del gen CAPNIO no está asociada a la presencia de enfermedad arterial coronaria en la población investigada.

Background: Diabetes mellitus type 2 (DMT2) is a well know cardiovascular risk factor and has been related to subclinic atherosclerosis, which might be explained by the presence of a common genetic basis in both diseases. Several polymorphisms of the cal-pain-10 gene (CAPNIO) have been associated with insulin resistance and DMT; nevertheless, there is insufficient evidence about their relation with coronary artery disease (CAD). Thus, in the present study we investigated the possible association between the SNP-43 variant of CAPNIO and the presence of CAD in Chilean subjects. Methods: A total of 218 unrelated patients with diagnosis of CAD confirmed by angiography (33-74 years old) and 194 healthy controls (30 - 68 years old) were included in this study. The SNP43 variant of the CAPNIO gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution for SNP43 variant of CAPNIO gene in CAD patients (GG: 51.4 percent; GA: 42.7 percent; AA: 5.9 percent) and controls (GG: 59.6 percent; GA: 35.1 percent; AA: 5.2 percent) was similar (P=0.228). Similarly, the allelic frequency was no different (P = 0.200). The OR for CAD related to AA homozygous genotype was 1.17 (95 percent C.I. = 0.50 - 2.72), confirming the absence of association. Conclusion: These findings suggest that the SNP43 polymorphism of the CAPNIO gene is not associated to CAD in the studied individuals.

Asociación del polimorfismo rs2241766 del gen de la adiponectina y enfermedad arterial coronaria en individuos del sur de Chile / Association between single nucleotide polymorphism of adiponectin gene and coronary artery disease in Southern Chilean subjects

La adiponectina, hormona peptídica secretada por los adipocitos, actúa inhibiendo la formación de la placa ateromatosa en casi todas sus etapas, ya sea modulando la respuesta inflamatoria, inhibiendo la expresión de moléculas de adhesión, la activación de monocitos, la formación de células espumosas y la migración y proliferación de células de músculo liso. En el presente estudio, fue evaluada la frecuencia del polimorfismo 45TMJ (rs2241766) del gen que codifica para la hormona adiponectina (ADIPOQ), junto con su posible contribución al desarrollo de enfermedad coronaria en individuos del sur de Chile. Métodos: Fueron evaluados 416 individuos adultos (30 a 68 años); 200 casos confirmados por angiografía y 216 controles. La genotipificación del polimorfismo 451>G del gen ADIPOQ se realizó mediante la técnica de PCR-RFLP. Resultados: El análisis de los resultados demuestra que la presencia del alelo G del polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ duplica el riesgo de padecer enfermedad coronaria en la población estudiada (OR= 2.06; I.C.95 por ciento: 1.36-3.14). Conclusión: Nuestros datos revelaron la existencia de una interesante asociación entre el polimorfismo 45T>G del gen ADIPOQ y enfermedad arterial coronaria en los sujetos analizados. Es importante destacar, que este hallazgo constituye el primer antecedente en población chilena.

Background: Adiponectin, encoded by ADIPOQ gene, is a hormone secreted by adipocytes that acts inhibiting the atheromatous plaque formation, modulating the inflammatory response and inhibiting the expression of adhesion molecules with subsequent inhibition of adhesion and macrophage activation, foam cells formation and migration and proliferation of smooth muscle cells. Aim: to evaluate the possible association between the rs2241766 polymorphism of the ADIPOQ gene with coronary artery disease (CAD) in Southern Chilean subjects. Methods: We evaluated 416 unrelated individuals (38 -68 years old); 200 with CAD confirmed by angiography and 216 control individuals from Temuco city (Chile). The rs2241766 polymorphism (45T>G) of ADIPOQ gene was determined by PCR-RFLP. Results: CAD patients exhibited a high frequency of G allele when compared to controls (17 percent vs. 9 percent; p<0.001). The OR for CAD associated to G allele was 2.06 (95 percent CI: 1.36 - 3.14) confirming the association observed. Conclusion: Our data show that the rs2241766 ADIPOQ gene polymorphism contributed to CAD risk in the studied population.

Polimorfismos genéticos de APOA5 se asocian a hipertrigliceridemia e hiperglicemia en individuos chilenos con enfermedad coronaria y controles / Genetic polymorphisms of APOA5 are associated with hypertriglyceridemia and hyperglycemia in Chilean subjects with coronary artery disease and controls

Introducción: Diversas variantes genéticas han sido relacionadas al desarrollo de enfermedad coronaria y/o sus factores de riesgo; entre ellas, los polimorfismos S19W y -1131T>C del gen que codifica para la apolipoproteína A5 (APOA5). Así, el objetivo del presente estudio fue investigar la posible asociación entre las variantes S19W y -1131T>C del gen APOA5 y enfermedad coronaria en individuos chilenos. Métodos: Se evaluaron 425 sujetos adultos, no relacionados; 209 pacientes con enfermedad coronaria (EC) comprobada por angiografía (estenosis→ 70 por ciento), con edades entre 33 y 74 años, y 216 individuos controles (30 a 68 años). La genotipificación de los polimorfismos S19Wy -1131T>C del gen APOA5 fue realizada mediante la técnica de PCR-RFLP Resultados: La distribución de los genotipos para el polimorfismo S19W del gen APOA5 en el grupo casos (SS: 80 por ciento, SW: 19 por ciento y WW: 1 por ciento) y en el grupo control (SS: 82 por ciento, SW: 17 por ciento y WW: 1 por ciento) fue semejante (p=NS). La distribución genotípica para el polimorfismo -1131T>C en pacientes con EC (TT: 56 por ciento, TC: 37 por ciento, y CC: 7 por ciento) y controles (TT: 63 por ciento, TC: 30 por ciento y CC: 7 por ciento) fue similar (p=NS). Las ORs relacionadas a los alelos mutados 19W (1.12; I.C.95 por ciento, 0.72- 1.74, p=NS)y-1131C (1.19; I.C.95 por ciento,, 0.87- 1.63, p=NS), confirman la ausencia de asociación. Por otro lado, las concentraciones de triglicéridos y glucosa en ayunas fueron significativamente más elevadas en los sujetos portadores de los alelos 19Wy -1131C, tanto en casos como en controles (p<0.05). Conclusión: La asociación observada entre las variantes genéticas de APOA5 y las altas concentraciones séricas de triglicéridos y glucosa, en ambos grupos, sugiere que estos polimorfismos podrían contribuir al desarrollo de la dislipidemia diabética; un reconocido factor de riesgo para enfermedad arterial coronaria.

Background: Several genetic variants have been linked to the development of coronary heart disease and/or their risk factors, including the S19Wand-1131T> C polymorphisms of the gene that encodes apolipoprotein A5 (APOA5). Thus, the objective of this study was to investigate the possible association between S19W and -1131T>C genetic variants ofAPOA5 and coronary disease in Chilean individuals. Methods: We evaluated 425 not related subjects; 209 patients with coronary artery disease (CAD) confirmed by angiography (stenosis→ 70 percent,), aged between 33 and 74 years, and 216 control individuals (30 to 68 years). The genotyping of S19W and -1131T>C polymorphisms of APOA5 gene was evaluated by PCR-RFLP. Results: The genotype distribution of S19W polymorphism of APOA5 gene in CAD patients (SS: 80 percent,, SW: 19 percent, WW: 1 percent>) and controls (SS: 82 percent,, SW: 17 percent, WW: 1 percent>) was similar (p = NS). In the same way the genotype distribution of-1131T>C genetic variant in CAD subjects (TT: 56 percent,, TC: 37 percent,, and CC: 7 percent>) and controls (TT: 63 percent,, TC: 30 percent, and CC: 7 percent) was equivalent (p = NS). The Odds ratios related to the mutant alleles 19W (1.12, 95 percent, Cl, 0.72 - 1.74, p = NS) and -1131C (1.19, 95 percent, Cl, 0.87 -1.63, p = NS) confirms the absence of association. On the other hand, the triglycerides and fasting glucose concentrations were significantly higher in subjects carrying the alleles 19W and -1131C, in both groups, CAD patients and controls (p <0.05). Conclusion: The observed association between genetic variants of APOA5 and higher serum levels of triglycerides and glucose, in both groups, suggesting that these polymorphisms could be contribute to the development of diabetic dyslipidemia, a known risk factor for coronary artery disease.

Clasificación de masas cervicales diagnosticadas en niños menores de 15 años / Classification of cervical masses diagnosed in children below 15 years old

Se realizó un estudio de tipo prospectivo y descriptivo, en el cual se analizaron 30 casos de niños con diagnóstico de masa cervical pertenecientes al Hospital Dr. Robert Reid Cabral, Santo Domingo, República Dominicana, en edades comprendidas entre 0-15 años, durante el período de marzo a julio 1991. Donde encontramos que el sexo más afectado fue el masculino, el grupo etario más frecuente era el comprendido entre 0-4 años, y la localización topográfica de mayor incidencia lo fue la región lateral del cuello con un 53